302.0103. Исследование агрегации тромбоцитов методом оптической агрегатометрии (индуктор - адреналин, от 1 до 2 концентраций индуктора)

Исследуемый биоматериал
Кровь из вены.


Синонимы
Агрегация тромбоцитов с адреналином. Индуцированная агрегация тромбоцитов.


Краткое описание
Это исследование способности тромбоцитов соединяться друг с другом в агрегаты под действием индуктора агрегации – адреналина. Исследование агрегации тромбоцитов с адреналином используется для оценки состояния тромбоцитарного звена гемостаза, диагностики врожденных и приобретенных тромбоцитопатий, оценки риска тромбозов, кровотечений и вызываемых ими заболеваний, контроля за антиагрегантной и проагрегантной терапией. Исследование агрегации тромбоцитов - единственное из всех клинических лабораторных исследований, проводимое на живых клетках.


Подготовка к исследованию
Пациент не должен принимать пищу за 10-12 часов перед визитом в лабораторию, можно только пить воду без газа. За день до сдачи анализов необходимо избегать стресса, физических нагрузок, смены режима дня, питания, приема алкоголя. 30 минут перед забором крови нужно соблюдать покой, не нервничать, не курить. Пациенту необходимо обязательно сообщить медицинскому персоналу о получаемых им лекарственных препаратах.


Читать подробнее о Правилах подготовки к лабораторным исследованиям


Факторы, влияющие на результаты
Определяемая в ходе исследования функциональная активность тромбоцитов и их способность к агрегации могут занижаться проводимой антиагрегантной терапией, приемом аспирина, адреноблокаторов, нестероидных противовоспалительных препаратов, стероидных гормонов, ингибиторов АПФ, гормональных контрацептивов, антибиотиков, антибактериальных препаратов, антидепрессантов, мочегонных, клофибрата, дипиридамола, пропроналола. К получению завышенных результатов может приводить курение. Также результаты могут быть искажены при проведении исследования не натощак, нарушениях липидного обмена, сопровождающихся выраженной липемией.


Читать подробнее о Факторах, влияющих на результат лабораторных исследований


Подробная информация об исследовании
Агрегация тромбоцитов – важный и обязательный этап свертывания крови, необходимый для формирования тромба и остановки кровотечения. Активная агрегация тромбоцитов способствует образованию тромбов, сниженная - увеличивает риск кровотечений. При избыточной агрегации в первую очередь нарушается проходимость капилляров и мелких сосудов. Это может привести к ухудшению кровоснабжения головного мозга и развитию инсульта.

Адреналин – это один из естественных физиологических активаторов тромбоцитов. В самих тромбоцитах адреналин не содержится. Агрегация тромбоцитов с адреналином в значительной мере зависит от концентрации кальция. При физиологической концентрации кальция (2,1-2,7 мМ/л) и низком фоновом содержании адреналина в крови, он в естественных условиях не вызывает агрегацию тромбоцитов. Однако, даже находясь в крови в низкой концентрации, адреналин способен усиливать действие других индукторов агрегации. Такой эффект адреналин проявляет уже при концентрации выше 0,01 мкмоль/л. Нормальная концентрация адреналина в крови существенно выше и составляет <0,45 мкмоль/л. Ситуация радикально меняется при дополнительном выбросе адреналина в кровь. Стресс, кардиогенный шок, курение, сопровождаются многократным (в 5-50 раз) повышением концентрации адреналина в крови. В этом случае адреналин, даже при нормальной концентрации кальция, становится самостоятельным и значимым фактором внутрисосудистой агрегации тромбоцитов.

В условиях лаборатории агрегация тромбоцитов исследуется в образце крови, содержащей цитрат натрия. Это соединение связывает кальций, что делает возможной агрегацию с адреналином. При вызванном цитратом значительном снижении концентрации кальция, адреналин в концентрации 5-10 мкмоль/л вызывает дозозависимую агрегацию тромбоцитов. Под действием адреналина на поверхности тромбоцитов появляются GPIIb-IIIa рецепторы (для фибриногена) и развивается первичная кальций-зависимая агрегация. Затем происходит активация простагландин-тромбоксановой системы, из внутренних гранул тромбоцитов в кровь высвобождаются содержащиеся в них собственные эндогенные индукторы (фактор Виллебранда, бета-тромбоглобулин, тромбоспандин, фибронектин), что вызывает вторю волну агрегации. Следует учитывать, что дозозависимый эффект адреналина на агрегацию тромбоцитов проявляется в меньшей степени, чем, например, у АДФ.

Результатом исследования является агрегатограмма. Это график, иллюстрирующий образование тромбоцитарных агрегатов в процессе исследования. Измеряются задержка развития агрегации, скорость развития агрегации, максимальная и финальная амплитуда агрегации, интенсивность дезагрегации. Каждый из этих параметров характеризуется диапазоном нормальных значений, который зависит от использованной концентрации адреналина. Диагностическое значение имеют на только их численные значения, но, в не меньшей степени, форма агрегатограммы. В зависимости от концентрации адреналина и состояния самих тромбоцитов, их агрегация может быть обратимой или необратимой, завершенной или не завершенной, одноволновой или двухволновой.


Показания к назначению
Обследование назначается при склонности к тромбозам или кровотечениям, сердечно-сосудистых заболеваниях, невынашивании беременности, диагностике врожденных и наследственных тромбоцитопатий, контроле за антиагрегантной или проагрегантной терапией.


Референсный интервал
Индивидуален для каждого параметра агрегатограммы, зависит от действующей концентрации адреналина и использованного оборудования. Указывается на бланке результата исследования.


Интерпретация результата
При концентрации адреналина 5 мкмоль/л развивается замедленная, часто двухволновая агрегация. С повышением концентрации адреналина до 10 мкмоль/л задержка развития агрегации укорачивается, скорость развития агрегации возрастает и она становится одноволновой. Максимальная интенсивность агрегации при использовании концентраций 5 и 10 мкмоль/л, как правило, идентична, дезагрегация минимальная. Таков характер агрегатограмм при использовании адреналина у здорового человека. При сниженной, обратимой агрегации тромбоцитов у пациента повышен риск кровотечений, при чрезмерно интенсивной, полностью необратимой агрегации возрастает риск тромботических осложнений.

Отклонения от нормы характерны для врожденных или приобретенных тромбоцитопатий, проявляющихся нарушением адгезии и агрегации (болезнь Виллебранда, синдром Бернара-Сулье, тромбастения Гланцмана, синдром Скотта, дефекты пулов хранения и др.), а также проводимой антиагрегантной или проагрегантной терапии. Например, при болезни Виллебранда и синдроме Бернара-Сулье, дефекте рецептора GP Ia/IIa и GP5 (рецептор коллагена) первая и вторая волна агрегации тромбоцитов с адреналином, как правило, соответствуют норме. При тромбастении Гланцмана агрегация тромбоцитов с адреналином отсутствует. При синдроме «серых» тромбоцитов, дефиците т.н. плотных гранул (дефекты пула хранения), нарушениях секреции эндогенных индукторов снижается интенсивность первой и, особенно, второй волны агрегации с адреналином, но дезагрегация почти никогда не происходит. Дефект активности тромбоцитарных фосфолипаз и тромбоксансинтетазы сопровождается снижением интенсивности агрегации с адреналином, также вызванным нарушением формирования ее второй волны. Тяжелая гипофибриногенемия, афибриногенемия ведут к снижению или полному отсутствию агрегации с адреналином. Антиагрегантная терапия с использованием блокаторов P2Y12 рецепторов (клопидогрель, тиклопидин) вызывает незначительное снижение интенсивности агрегации с адреналином, часто на агрегации с адреналином прием этих препаратов вообще не сказывается. Аспирин и другие нестероидные противовоспалительные препараты ведут к снижению интенсивности агрегации с адреналином с нарушением формирования ее второй волны.

Адекватная проагрегантная терапия ожидаемо ведет к повышению интенсивности и скорости развития агрегации. Во всех случаях интерпретация агрегатограмм требует знания особенностей используемого оборудования.


Метод исследования
Фотометрия.


Единицы измерения
Для амплитуды агрегации и дезагрегации - % (проценты).
Для задержки развития агрегации – сек. (секунды).
Для скорости развития агрегации - %/сек (процент в секунду).


Используемое оборудование
Автоматический коагулометр «CS-2000i» («Sysmex», Япония).